Спросить
Войти
УДК 575.1/.2:574.2(1-925.121)
ЧАСТОТА МИКРОЯДЕР В КЛЕТКАХ КРОВИ РЫБ ПРЕСНЫХ ВОДОЁМОВ ПОЛУОСТРОВА ТАЙМЫР
MICRONUCLEI FREQUENCY IN FISH BLOOD CELLS OF FRESH WATERS TAIMYR PENINSULA
В.И. Крюков, доктор биологических наук, профессор
V.I. Kryukov, Doctor of Biological Sciences, Professor
Орловский государственный аграрный университет
Orel State Agrarian University
П.В. Кочкарёв, кандидат биологических наук
P.V. Kochkariov, Ph.D. in Biological Sciences
Центральносибирский государственный природный биосферный заповедник
Central Siberian Nature Reserve
Авторы приводят результаты исследования частот микроядер в периферической крови 9 видов рыб из пресных водоёмов полуострова Таймыр. Частота аномалий варьировала от 0 до 0,1%. Полученные результаты могут быть использованы для сравнительного анализа при ведении фонового мониторинга водных экосистем Таймыра.
The authors give the results of the study the frequency of micronuclei in the peripheral blood of 9 species of fish from fresh water of the Taimyr Peninsula. The frequency of abnormalities ranged from 0 to 0.1 %. The results can be used for comparative analysis in the conduct of baseline monitoring of Taimyr water ecosystems.
БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
Тундровые и лесотундровые экосистемы, эволюционно сложившиеся в высоких широтах Евразии, экологически очень хрупкие. Поэтому сильные антропогенные воздействия могут существенно нарушать их устойчивое развитие. В связи с этим необходимо детальное изучение экологии естественных, не нарушенных человеком, экосистем и постоянный контроль состояния тех экосистем, которые испытывают антропогенное воздействие. С этой целью были выполнен анализ генетических нарушений у различных животных полуострова Таймыр. Исследования проведены по заданию российского представительства Программы Развития ООН (контракт № 2007-251-01 (ChartFidd: 48248^2-62000-57205-001093-10003 асс71305)), их результаты представлены в официальном отчёте, но не были опубликованы. В данном сообщении
изложены результаты изучения частоты микроядер у индикаторных видов рыб.
Во время полевых работ были получены мазки кровиот 52 рыб 9-ти видов: гольца (Ба1уе-1тш (Nemachilus)sp., налима (Lotalota), осётра сибирского (ЛаретегЬаел), ряпушки (сибирской?) (Coregonus ^аЫте11а?)), сига (Corego-nussp.), сороги (плотвы сибирской, ЯиШшгиШш-lacoctris), стерляди (ЛаретеггШепш), хариуса (ТЫтаПшагс^сш)и чира (Coregonusnasus). Рыб ловили удочкой, а также использовали рыб, извлечённых из браконьерских сетей, обнаруженных сотрудниками Таймырского отдела Управления Россельхознадзора во время инспекционных рейдов по Енисею, и рыб, отловленных в оз. Кета сотрудниками Государственного природного заповедника «Путоранский» и ГНУ НИИСХ Крайнего Севера для проводимых ими плановых
исследований. Рыбы ценных видов, извлечённые из браконьерских сетей, после получения мазка крови из небольшого надреза на плавнике или хвосте, были выпущены в Енисей. Рыбы были пойманы в августе 2007 г.в следующих районах: 1)правый берег Енисея в районе посёлка Анань-ино (69о30&с.ш., 85о30&в.д.); 2) правый берег Енисея в 30 км вверх по течению от посёлка Пота-пово («69°00&с.ш., 86°15&в.д.); 3) биостационар заповедника «Путоранский» на берегу оз. Кета; 4)озеро Ладаннах, в 40 км.от истока р. Нижняя Агапа.
Мазки крови окрашивали уксуснокислым орсеином. Препараты анализировали при увели-чении2500 с использованием микроскопа «AxюImagerA1» (CarlZeiss). На окрашенных препаратах подсчитывали по «1 тыс. нормальА
ных эритроцитов от каждой рыбы, фиксируя при этом (дополнительно к количеству нормальных эритроцитов) число клеток с микроядрами. Микроядра типизировали в соответствии со схе-мой(рис.): микроядра «стандартного» вида (а), «прикреплённые» (б), «соединёнными с ядром нитью хроматина» (в), неоформленный ядерный материал в виде палочек (г-1) или клубков (г-11), округлые образования ядерного материала довольно большого размера (д) [1]. Для сравнения разных выборок использовали суммарную частоту клеток с микроядрами. Статистический анализ частот и сравнение долей аномальных клеток (т.е. клеток имеющих микроядра) в разных выборках выполняли с использованием ^ критерия после ф-преобразования частот в соответствии с рекомендациями [2, 3].
Рисунок 1 - Клетки крови рыбы. А - Общий вид мазка при малом увеличении; Б - тот же препарат при большом увеличении; В - схематическое изображение аномалий выявляемых при анализе.
Высокая чувствительность микроядерного теста показана многими исследованиями. Частота микроядер в клетках отражает частоту возникновения ацентрических фрагментов хромосом и обычно пропорциональна силе воздействия мутагенных факторов. Из 52 рыб, принадлежавших 9 различным видам, микроядра выявлены в клетках крови 19-ти особей. В клетках крови остальных 33 рыб микроядра не обнаружены. В общей сложности у них среди 56703 проанализированных клеток обнаружено 30 клеток с микроядрами. Таким образом, общая частота клеток с микроядрами составляет 0,05±0,01%.
Анализ частот клеток с микроядрами по местам вылова рыб (независимо от их видовой
принадлежности) показал (табл. 1), что минимальные частоты клеток с микроядрами обнаружены у рыб из Енисея в районе посёлка Ананьи-но (0,04%). Несколько выше были частоты аберрантных клеток в крови рыб из озера Кета и Ла-даннах (0,05 и 0,06, соответственно). Максимальная частота (0,10%) аномальных клеток обнаружена у рыб, отловленных в Енисее у посёлка Потапово. Более чем двукратные различия в частотах микроядер у рыб, отловленных в Енисее на участках, разделённых всего 170-200 километрами, вероятнее всего объясняются разным видовым составом выборок.
Таблица 1 - Частоты клеток с микроядрами (МЯ) в крови рыб, выловленных в разных географических точках полуострова Таймыр.
Места отлова рыбы Количество клеток Доля клеток, %
всего нормальных с МЯ нормальных с МЯ станд. ошибка
Ананьино 8541 8538 3 99,96 0,04 0,02
Потапово 7099 7092 7 99,90 0,10 0,03
оз. Кета 26627 26615 12 99,95 0,05 0,01
оз. Ладаннах 14436 14428 8 99,94 0,06 0,02
Анализ частот клеток с микроядрами у каждого из видов рыб (независимо от места вылова) показал следующие результаты (табл. 2). В клетках крови сороги и чира микроядра не были обнаружены. Вероятно, это связано с небольшим количеством проанализированного материала (3131 клетка у 3 сорог и 5320 клеток у 5 чиров). У остальных видов частота клеток с микроядрами варьировала от 0,03 до 0,10. Максимальная частота аберрантных клеток обнаружена у стерляди. Эти данные согласуются с результатами, полученными другими авторами [4]. Все обнаруженные различия не существенны, так как все частоты клеток с микроядрами лежат в пределах спонтанных величин и не имеют статистически достоверных отличий от них.
Таблица 2 - Частоты аберрантных клеток у рыб разных видов Таймыра
Места отлова рыбы Исследовано животных Количество клеток Доля клеток, %
всего нормальных с МЯ нормальных с МЯ станд. ошибка
Голец 7 8309 8308 7 99,92 0,08 0,03
Налим 8 8908 8905 3 99,97 0,03 0,02
Осётр 6 6463 6458 5 99,92 0,08 0,03
Ряпушка 3 3565 3562 3 99,92 0,08 0,05
Сиг 7 7366 7362 4 99,95 0,05 0,03
Сорога 3 3131 3131 0 100,00 0,00 0,00
Стерлядь 5 5026 5021 5 99,90 0,10 0,04
Хариус 8 8615 8612 3 99,97 0,03 0,02
Чир 5 5320 5320 0 100,0 0,00 0,00
Всего: 52 56703 56679 30 99,95 0,05 0,01
Таким образом, в четырёх обследованных водоёмах Таймыра частоты возникновения микроядер, отражающие частоту структурных аберраций хромосом, в соматических клетках рыб находятся в пределах спонтанных величин (0,05±0,01%). Это свидетельствует об отсутствии сильных мутагенных факторов в среде обитания этих рыб, в частности - в воде озёр Кета и Ла-даннах, а также в нижнем течении реки Енисей.
Литература:
В.И. Крюков - e-mail: ecogenet@mail.ru П.В. Кочкарёв - e-mail: csgbz@mail.ru
Статья поступила: 01.03.2013
